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    基因操作工具制備

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    腺病毒

    腺病毒(Adenovirus)是一種線性雙鏈DNA無包膜病毒,對分裂期細胞和非分裂期細胞均具有感染能力,且具有嗜上皮細胞性。重組腺病毒載體是以腺病毒為基礎發展起來的工具病毒載體,它可通過受體介導的內吞作用進入細胞內,但腺病毒基因組不整合進入宿主細胞基因組中。腺病毒作為一種常用的基因操作工具,在心血管領域、肝臟、肌肉、、腫瘤及其他領域廣泛應用。

    優勢

    腺病毒與其他病毒工具比較,具有以下優勢:

    a. 是研究原代非增殖細胞基因表達的最佳系統:腺病毒感染細胞后,1-2 天即可表達,是研究原代非增殖細胞基因表達的最佳系統;

    b. 滴度高:腺病毒系統在轉有 E1 基因的 HEK293 細胞中可進行自我復制,可產生滴度為1010 到1011PFU/mL 的病毒;

    c. 載體容量大: 可容納不超過5kb 的片段;

    d. 不整合到染色體中,無插入致突變性:腺病毒除卵細胞以外,幾乎在所有已知細胞中都不整合到染色體中,因此避免了因整合而引發的潛在的基因突變和隨機效應 。

    病毒表達系統 腺病毒
    (Adenovirus)
    慢病毒
    (Lentivirus)
    腺相關病毒
    (Adeno-As sociate virus)
    病毒基因組 雙鏈DNA病毒 RNA病毒 單鏈DNA病毒
    復制 條件復制 不可復制 條件復制
    滴度 最高可達1012pfu/ml 最高可達109TU/ml 最高可達1012-13v.g/ml
    感染細胞類型 感染分裂和不分裂細胞 感染分裂和不分裂細胞 感染分裂不旺盛的細胞
    表達豐度 高水平表達 中到高水平表達 高水平表達
    表達時間 快(1-2天) 慢(2-4天) 1-2周
    持續表達時間 病毒基因組游離于宿主基因組外,
    瞬時表達外源基因
    病毒基因組整臺于宿主基因組,
    長時間、穩定表達外源基因
    病毒基因組游離于宿主基因組外,
    在分裂旺盛的細胞中可長時間表達
    克隆容量 適合表達小于5kb的外源片段 適合表達小于4kb的外源片段 適合表達小于2.8kb的外源片段
    免疫原性 較高免疫原性 低免疫原性 低免疫原性
    安全性 可能會引起一些咳嗽流涕 暫無發現致病性,
    已被用于CAR-T治療作用于人體
    暫無發現致病性,
    已通過歐盟和FDA許可,
    用作基因治療藥物的載體

    包裝服務


    質量檢測


    科研-細胞級 科研-動物級
    產品特點 可快速獲得的純病毒 純度和滴度較高,滴度達1E+10PFU/m以上,
    可用于動物實驗
    適用范圍 適用于永生化細胞系,或作為病毒擴增毒種 適用于在難以轉染的細胞中表達特定基因,
    也可用于動物實驗
    質量標準 滴度≥1E+9 PFU/ml
    微生物檢測陰性
    滴度≥1E+10 PFU/ml
    復制性腺病毒水平<1 RCA/3.0×10^10VP
    病毒感染滴度/病毒顆粒數(IUVP) > 3.3%
    質粒DNA殘留≤4E+8 copy/ml
    宿主DNA殘留≤10 μg/ml
    微生物檢測陰性

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    載體選擇

    吉凱提供完善的腺病毒產品體系,用于操作編碼基因和非編碼基因,如lncRNA、microRNA、circRNA。以下腺病毒載體可供您選擇,點擊查看載體圖譜>>


    調控方式 載體編號 元件順序 原核抗性 真核抗性 熒光標記
    啟動子
    RNAi/過表達
    啟動子
    熒光標記
    過表達 GV345 CMV-MCS-3FLAG-SV40-Cherry Ampicillin SV40 CMV Cherry
    GV314 CMV-MCS-3FLAG-SV40-EGFP Ampicillin SV40 CMV GFP
    干擾 GV119 hU6-MCS-CMV-EGFP Ampicillin CMV U6 GFP
    miRNA-up GV202 hU6-MCS-CMV-EGFP Ampicillin CMV U6 GFP
    GV317 CMV-MCS-SV40-EGFP Ampicillin SV40 CMV GFP
    miRNA-down GV201 hU6-MCS-CMV-EGFP Ampicillin CMV U6 GFP

    應用案例

    1. 細胞感染

    腺病毒可有效感染神經元細胞、肝細胞、心肌細胞、腫瘤細胞、內皮細胞、干細胞等多種類型的細胞,對分裂細胞和非分裂細胞均具有感染能力。


    了解腺病毒細胞感染操作請點擊這里>>




    2. 在體注射
    2.1 神經系統

    表文吉凱客戶文章Brain Behavior and Immunity,2017.

    文獻來源:The long non-coding RNA Neat1 is an important mediator of the therapeutic effect of bexarotene on traumatic brain injury in mice.




    2.2 心臟

    代表文獻 吉凱客戶文章 Cardiovascular research, 2014, 102(1): 46-55.


    文獻來源:Silencing of Pellino1 improves postinfarct cardiac dysfunction and attenuates left ventricular remodeling in mice.




    2.3 肝臟

    代表文獻 吉凱客戶文章Laboratory lnvestigation,2017,97(9):1020

    文獻來源:Paired related homeobox protein 1 regulates PDGF-induced chemotaxis of hepatic stellate cells in liver fibrosis.




    2.4 肺

    代表文獻 European Respiratory Joumal,2010,36(4):907-914.


    文獻來源:Overexpression of transforming growth factor-β1 in fetal monkey lung results in prenatal pulmonary fibrosis.




    2.5 胰腺

    代表文獻 Molecular Therapy ,2011,19(1):60-66.


    文獻來源:Intra-arterial targeted islet-specific expression of Sirt1 protects β cells from streptozotocin-induced apoptosis in mice.


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    引用文獻

    1. Cardiac Fibroblast-Specific Activating Transcription Factor 3 Protects Against Heart Failure by Suppressing  MAP2K3-p38 Signaling. 2017, Circulation (IF= 18.881). 吉凱產品:過表達腺病毒 研究領域:心力衰竭  首都醫科大學附屬安貞醫院
    2. Yes-Associated Protein Promotes Angiogenesis Via Signal Transducer and Activator of Transcription 3 in Endothelial Cells. 2018, Circulation research (IF= 15.211). 吉凱產品:過表達腺病毒 研究領域:血管生成  天津醫科大學
    3. Transplanted Mesenchymal Stem Cells Reduce Autophagic Flux in Infarcted Hearts via the Exosomal Transfer of mir-125b. 2018, Circulation research(IF= 15.211). 吉凱產品:過表達腺病毒 研究領域:心肌梗死  浙江大學第二附屬醫院。
    4. Deficiency of tumor suppressor NDRG2 leads to attention deficit and hyperactive behavior. 2017, The Journal of Clinical Investigation (IF=13.251). 吉凱產品:過表達腺病毒 研究領域:多動癥  空軍軍醫大學(第四軍醫大學)附屬西京醫院
    5. Nuclear Smad6 promotes gliomagenesis by negatively regulating PIAS3-mediated STAT3 inhibition. 2018, Nature Communications (IF= 12.353). 吉凱產品:過表達腺病毒GV138和干擾慢病毒GV248 研究領域:膠質瘤  南京醫科大學無錫人民醫院
    6. Melatonin-mediated inhibition of Cav3.2 T-type Ca2+ channels induces sensory neuronal hypoexcitability through the novel protein kinase C-eta isoform. 2018, Journal of Pineal Research (IF= 11.613). 吉凱產品:干擾腺病毒 研究領域:神經  蘇州大學。
    7. Up-regulation of CD81 inhibits cytotrophoblast invasion and mediates maternal endothelial cell dysfunction in preeclampsia. 2017, Proceedings of the National Academy of Sciences (IF= 9.504). 吉凱產品:過表達腺病毒 研究領域:子癇前期發病機制  南京大學醫學院附屬鼓樓醫院
    8. MICU1 Alleviates Diabetic Cardiomyopathy Through Mitochondrial Ca2+–Depende. 2017, Diabetes (IF= 7.273). 吉凱產品:過表達腺病毒 研究領域:糖尿病心肌病  空軍軍醫大學(第四軍醫大學)

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