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    基因操作工具制備

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    質粒

    質粒是使用廣泛的基因操作工具,可以進行編碼基因、microRNA、lncRNA的功能研究、啟動子活性、轉錄因子及3’UTR調控研究等。

    優勢

    1.  瞬時表達,導入細胞后約24 小時就可以觀察到目的基因的表達;
    2.  構建技術簡單,因而成本也比較低。

    質粒 慢病毒 腺病毒 腺相關病毒
    外源基因表達時間 24h開始表達
    持續3-7天
    2-4天開始表達
    長時間穩定表達
    1-2天開始表達
    持續7-14天
    7-14開始表達
    細胞分裂不旺盛部位可長時間表達
    插入片段大小 < 5-8kb < 4kb < 5-8kb <2.8kb (包括必須的啟動
    子以及熒光或者標簽元件)
    穩定細胞株篩選 可以,但較難操作 可以,外源基因整合于
    主基因組,篩選簡單
    不可以,瞬時表達外源
    基因傳代后效果減弱
    不可以
    細胞實驗 細胞系,部分細胞
    轉染效率較低
    首選,廣譜,感染效率高 廣譜,感染效率高,
    適合原代非增殖細胞感染
    不適合細胞實驗
    動物實驗 不適合 適合,根據觀察時間
    和注射部位選擇
    較適合(免疫原性高),
    根據觀察時間和注射部位選擇
    首選,根據觀察時間和注射部位選擇
    滴度 最高可達109TU/ml 高達1012pfu/ml 高達1012-13v.g/ml

    質量標準

    吉凱采用高純度轉染級試劑盒進行抽提,按照ISO9001標準進行嚴格的質量控制,提供高標準質粒。


    科研-細胞級 科研-動物級
    產品特點 純度優于1次CsCI超速離心純化的質粒 純度優于2次CsCI超速離心純化的質粒
    適用范圍 適用于永生化細胞系的轉染試驗、特殊的修飾反應
    BAC或者cosmid建庫等試驗
    基因治療、細胞顯微注射、DNA疫苗、基因沉默
    ( RNAi)等要求嚴格的操作,以及轉染原代細胞、
    敏感細胞、懸浮細胞等對內毒素特別敏感的細胞株
    質量標準 內毒素< 50EU/ml,超螺旋比例> 90%,
    純度(OD260/280) =1.8-2.0,濃度> 200ng/ul
    內毒素< 10EU/ml,超螺旋比例> 90%,
    純度(OD260/280) =1.8~2.0,濃度> 500ng/ul

    載體選擇

    吉凱提供完善的慢質粒產品體系,用于操作編碼基因和非編碼基因,如lncRNA、microRNA、circRNA。以下慢病毒載體可供您選擇。點擊查看載體圖譜 >>

    調控方式 載體 元件順序 大小bp 原核抗性 真核抗性
    過表達 GV609 MCS -firefly_ Luciferase 4994 Ampicillin
    GV608 MCS -firfly_ Luciferase 4994 Ampicillin
    GV486 CMV-left circular frame-<br>MCS-right circular frame-EF1a-<br>copGFP- SV40-Neomycin 6275 Kanamycin Neomycin
    GV485 CMV-left circular frame-<br>MCS-right circular frame-<br>SV40-neomycin 6349 Ampicillin Neomycin
    GV272 SV40-firefly_ Luciferase-MCS 5010 Ampicillin
    GV238 MCS -firefly_ Luciferase 4994 Ampicillin
    GV230 CMV-MCS-EGFP-<br>SV40-Neomycin 4733 Kanamycin Neomycin
    GV219 CMV -MCS- SV40-Neomycin 5427 Ampicillin Neomycin
    GV146 CMV-MCS-IRES-EGFP-<br>SV40-Neomycin 5308 Kanamycin Neomycin
    GV141 CMV-MCS-3FLAG-<br>SV40-Neomycin 5508 Ampicillin Neomycin
    RNAi GV102 hU6-MCS-CMV-GFP-SV40-Neomycin 6380 Ampicillin Neomycin
    microRNA-down GV249 hU6- MCS-CMV-GFP-SV40-Neomycin 6380 Ampicillin Neomycin
    microRNA-up GV268 CMV -MCS-SV40-Neomycin 5427 Ampicillin Neomycin
    GV251 hU6-MCS -CMV-GFP-SV40-Neomycin 6380 Ampicillin Neomycin


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    引用文獻

    1. Identification of genomic alterations in oesophageal squamous cell cancer. 2014, Nature (IF= 41.577). 吉凱產品:過表達質粒 研究領域:食管鱗狀細胞癌  中國醫學科學院

    2. The Primate-Specific Gene TMEM14B Marks Outer Radial Glia Cells and Promotes Cortical Expansion and Folding. 2017, Cell stem cell (IF= 23.29). 凱產品:過表達質粒 研究領域:神經  中科院生物物理所

    3. Reciprocal Activation between PLK1 and Stat3 Contributes to Survival and Proliferation of Esophageal Cancer Cells. 2011, Gastroenterology (IF=20.773). 吉凱產品:siRNA合成,RNAi質粒 研究領域:食管癌  中國醫學科學院

    4. Nuclear AURKA acquires kinase-independent transactivating function to enhance breast cancer stem cell phenotype. 2016, Nature Communications (IF=12.353). 吉凱產品:過表達質粒 研究領域:乳腺癌   中山大學

    5. A novel autophagy/mitophagy inhibitor liensinine sensitizes breast cancer cells to chemotherapy through DNM1L-mediated mitochondrial fission. 2015, Autophagy (IF= 11.1). 吉凱產品:質粒 研究領域:乳腺癌  第三軍醫大學

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