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    N-糖基化label free

    糖基化是指蛋白質在酶的作用下被連接上糖鏈的修飾類型。細胞內超過50% 的蛋白質都有糖基化修飾。N-糖基化是指糖鏈連接于天冬酰胺(Asn)殘基上的糖基化形式,參與細胞識別、免疫應答、細胞分化等生命活動。N-糖基化label free技術是利用凝集素將糖基化肽段富集出來后再切除糖鏈后聯合label free技術進行糖肽位點以及定量分析。

    技術流程

    ?N-糖基化label free技術流程圖

    技術原理

    1. 蛋白質經酶解后利用凝集素富集N-糖基化肽段,再用N-糖酰胺酶F(PNGase F)在H218 O中切除糖鏈,使得糖基化修飾過的位點引入18 O,分子量的增加使得在液質聯用系統中能夠輕松辨別出該位點,從而確定N-糖基化發生的位點;

    2. 定量原理同label free,具體請見Label free界面。

    吉凱基因實驗流程

    吉凱基因優勢

    1. 軟硬件先進(儀器為QE和QE PLUS,軟件為MaxQuant);

    2. 質控嚴格(預實驗中每個樣本都需要進行蛋白質級別和預質譜級別的質檢,不合格的給予合理建議。同時對儀器條件進行嚴格監控,發現不合格則重新開展實驗,確保實驗數據有效);

    3. 專業的團隊(團隊成員經驗豐富,能處理幾乎所有類型的樣本分析);

    4. 強大的生信分析團隊(除GO,KEGG等常規的分析外,還能進行IPA,趨勢聚類,蛋白質相互作用以及其他個性化分析)。

    吉凱基因成功案例

    參考文獻

    Campbell J D, Alexandrov A, Kim J, et al. Distinct patterns of somatic genome alterations in lung adeno-carcinomas and squamous cell carcinomas[J]. Nature Genetics, 2016, 48(6):607.

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