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    靶標驗證

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    EMT分子marker檢測

    通過Western Blot的方法檢測細胞中EMT marker蛋白表達量,判斷EMT過程的變化,從而反映細胞轉移能力和侵襲能力變化

    技術原理

    上皮細胞-間充質轉化(EMT),是指上皮細胞通過特定程序轉化為具有間質表型細胞的生物學過程。在胚胎發育、慢性炎癥、組織重建、癌癥轉移和多種纖維化疾病中發揮了重要作用,其主要的特征有細胞黏附分子(如E-鈣黏蛋白)表達的減少、細胞角蛋白細胞骨架轉化為波形蛋白(Vimentin)為主的細胞骨架及形態上具有間充質細胞的特征等。通過EMT,上皮細胞失去了細胞極性,失去與基底膜的連接等上皮表型,獲得了較高的遷移與侵襲、抗凋亡和降解細胞外基質的能力等間質表型。EMT是上皮細胞來源的惡性腫瘤細胞獲得遷移和侵襲能力的重要生物學過程。

    通過Western Blot的方法檢測細胞中目的基因敲減或過表達后EMT marker蛋白表達量,可判斷目的基因表達變化后是否能抑制EMT過程的發生,從而判斷該基因是否為轉移相關基因。

    結果展示


    用待研基因shRNA慢病毒感染NOZ細胞,5天后收集細胞進行EMT marker蛋白Western Blot檢測,結果顯示,shRNA下調目的基因表達后,NOZ細胞EMT過程受到抑制,表明待研基因與NOZ細胞轉移相關。

    參考文獻

    Kapur N, et al. CCR6 expression in colon cancer is associated with advanced disease and supports epithelial-to-mesenchymal transition. Br J Cancer. 2016 Jun 14;114(12):1343-51.

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